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產(chǎn)品簡介:
目上常用的蛋白濃度檢測方法是:BCA蛋白定量試劑盒(BCAProteinAssayKit)和Bradford蛋白定量試劑盒(BradfordProteinAssayKit)。改良Lowry法蛋白定量試劑盒是利用蛋白中肽鍵與銅離子結(jié)合成四配位基銅離子復合物,后者與Folin試劑(福林酚)反應,產(chǎn)生藍色比色物,用分光光度法(酶標儀或分光光度計)檢測750nm處吸光度,并與標準曲線比較,求得待測蛋白樣品的濃度,在1~1500μg/ml濃度范圍內(nèi)有較好的線性關系。
組成:
產(chǎn)品名稱 | PD003-500T | PD003-1000T | Storage | ||
試劑(A):Folin-CiocalteuReagent | 5ml | 10ml | RT避光 | ||
試劑(B):改良LowryReagent | B1:LowryA | 100ml | 2×100ml | RT | |
B2:LowryB | 2ml | 4ml | RT | ||
B3:LowryC | 2ml | 4ml | RT | ||
臨用,按LowryA:B:C=50:1:1比例配制改良LowryReagent,即配即用。 | |||||
試劑(C):蛋白標準(BSA,10mg/ml) | 1ml×2 | 4ml | -20°C | ||
試劑(D):蛋白標準稀釋液 | 2ml | 4ml | RT | ||
說明書 | 一份 | ||||
根據(jù)樣品數(shù)量按照試劑(A):Folin-CiocalteuReagent:ddH2O=1:1的比例配制工作液現(xiàn)配現(xiàn)用
儲存條件:
12個月有效。
改良Lowry法蛋白定量試劑盒 操作步驟(僅供參考):
1、取適量10mg/ml蛋白標準,稀釋至終濃度為1500μg/ml或所需濃度。如取150μl 10mg/ml蛋白標準,加入850μl稀釋液,充分混勻,即配制1500μg/ml蛋白標準。
2、根據(jù)樣品數(shù)量,按試劑(B1):試劑(B2):試劑(B3)=50:1:1的比例配制改良LowryReagent工作液,充分混勻。
3、將1500μg/ml蛋白標準用稀釋待測樣品的溶液5倍梯度稀釋,濃度分別為300μg/ml、60μg/ml、12.5μg/ml、2.5μg/ml、0μg/ml,各取40μl加到96孔板的標準品孔。
4、加待測蛋白樣品或稀釋液(空白對照)到96孔板的樣品孔中,如果標準品稀釋液與溶解待測蛋白樣本的溶液不同,應在待測蛋白樣本孔中加入40μl稀釋液;如果標準品稀釋液與溶解待測蛋白樣本的溶液相同,無需在待測蛋白樣本孔中加入40μl稀釋液。
5、用多通道微量移液器快速將200μl配置好的改良LowryReagent工作液加入至各孔,立即在96孔板混勻器上混勻30s或手動輕輕混勻。室溫準確孵育。
6、用多通道微量移液器快速將20μl新鮮配置的Folin-Ciocalteu工作液加至上述各孔中,立即在96孔板混勻器上混勻30s或手動輕輕混勻30s。
7、輕輕混勻96孔板,酶標儀或微量滴定板讀數(shù)儀測定750nm處吸光度,也可用分光光度計測定,但應考慮根據(jù)比色皿的小檢測體積,檢測樣品數(shù)量亦相應減少。
注意事項:
1、蛋白標準原液中含有防腐劑,不影響后續(xù)檢測,該蛋白標準原液-20℃保存。
2、待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中,蛋白標準也宜溶解于什么樣的稀釋液中,否者待測蛋白與蛋白標準中所含非蛋白成分不一致,有可能導致測定不準確。
3、如果沒有酶標儀,也可以使用普通的分光光度計測定,但應考慮根據(jù)比色皿的小檢測體積。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
5、本產(chǎn)品僅供科研使用,嚴禁它用。
標簽:蛋白定量試劑盒 試劑盒 本生試劑盒 試劑A
改良Lowry法蛋白定量試劑盒 本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司在經(jīng)營中始終秉承:遵紀守法,嚴于律己,寬仁以待,敢于承擔的企業(yè)精神作為標準,以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務來維護和拓展市場,較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標。本生!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作,共創(chuàng)美好的未來。本生移液器吸頭
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