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15502280048
品牌 | 其他品牌 | 產地 | 國產 |
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級別 | 其他 |
土壤酸性蛋白酶活性檢測試劑盒分光光度法 天津本生
中文名稱:土壤酸性蛋白酶活性檢測試劑盒
儲存條件2-8℃
單位盒
有效期6個月
英文名稱Soil Acid Protease Activity Assay Kit
檢測方法可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格50T/24S
產品組成:使用前請認真核對試劑體積與瓶內體積是否一致,有疑問請及時聯系索萊寶工作人員。
試劑名稱 規(guī)格 保存條件
試劑一 液體 20 mL×1 瓶 2-8°C保存
試劑二 粉劑×1 瓶 2-8°C保存
試劑三 液體 12 mL×1 瓶 2-8°C保存
試劑四 液體 40 mL×1 瓶 2-8°C保存
試劑五 液體 10 mL×1 瓶 2-8°C保存
試劑六 液體 15 mL×1 瓶 2-8°C保存
標準品 液體 1 mL×1 支 2-8°C保存
溶液的配制:
1、 試劑二:臨用前加入 10 mL 試劑六,沸水浴攪拌溶解后待用,用不完的試劑 2-8°C保存 1 個月。
2、 標準品:20μmol/mL 酪AN酸溶液。
產品說明:
土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質以及其他含蛋白質氮的有機化合物的轉化,其水解產物是高等植物的氮源之一。土壤酸性蛋白酶在酸性環(huán)境下催化蛋白質水解,與土壤有機質含量、氮素及其他土壤性質有關。酸性條件下,土壤酸性蛋白酶可將酪蛋白水解產生酪AN酸;在堿性條件下,酪an酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍,在680nm有特征吸收峰。
Casein Tyrosine Phosphomolybdic acid + Tyrosine Tungsten blue 680nm
注意:實驗之前建議選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內建議稀釋或者
增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調式移液槍、1mL玻璃比色皿、臺式離心機、研缽、蒸餾水、30-50
目篩。
操作步驟:
一、樣本處理(可適當調整待測樣本量,具體比例可以參考文獻)新鮮土樣自然風干或 37°C烘箱風干,過 30~50 目篩。
二、測定步驟
Soil acid protease,H+OH-
1、 分光光度計預熱30min 以上,調節(jié)波長至680nm,蒸餾水調零。
2、 標準溶液的稀釋:取10μL 20μmol/mL酪an酸標準液,加入990μL蒸餾水,充分混勻,配制成0.2μmol/mL標準液使用,現用現配。(實驗中每管需要220μL,為減小實驗誤差,故配制大體積。)
3、 樣本測定
試劑名稱 測定管 對照管 標準管 空白管
風干土樣(g) 0.1 0.1 - -
試劑一(μL) 200 200 - -
試劑二(μL) 100 - -
充分混勻后,37°C水浴/恒溫培養(yǎng)箱中反應24h,期間振蕩5-6 次,
使土樣與反應液充分接觸。 - -
試劑三(μL) 200 200 - -
試劑二(μL) - 100 - -
混勻,10000rpm 室溫離心10min,取上清液待測 - -上清液(μL) 220 220 - -
0.2μmol/mL標準液(μL) - - 220 -
蒸餾水(μL) - - - 220
試劑四(μL) 650 650 650 650
試劑五(μL) 130 130 130 130
混勻,40°C水浴或恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng) 10min,10000rpm 室溫離心 10min,取上清液于 680nm 下讀取各管吸光值 A,分別記為 A 測定管、A 對照管、A 標準管、A 空白管,計算ΔA 測定=A 測定管-A 對照管,ΔA標準=A 標準管-A 空白管。(標準管、空白管只需測 1-2 次,每個測定管需設一個對照管)
三、土壤酸性蛋白酶活性計算
單位定義:每天每g土樣中產生1μmol的酪an酸為一個土壤酸性蛋白酶活力單位。
土壤酸性蛋白酶(U/g 土樣)=C標準×ΔA測定÷ΔA標準×V反總÷W÷T=0.1×ΔA測定÷ΔA標準÷W
C標準:標準管濃度,0.2μmol/mL;V反總:反應體系總體積,0.5mL;T:反應時間,1d;W:樣本質量,g。
注意事項:
當吸光值大于1時,建議將上清液用蒸餾水稀釋后進行測定,計算時注意乘以稀釋倍數。
實驗實例:
1、 分別稱取 2 份 0.1g 土樣于 1.5mLEP 管中,分別為對照管及測定管。按照測定步驟操作,使用 1mL 玻璃比色皿 測 定 吸 光 度 , 計 算 ΔA 測 定 =A 測 定 管 -A 對 照 管 =0.206-0.178=0.028 , ΔA 標 準 =A 標 準 管 -A 空 白 管=0.540-0.028=0.512,按土壤質量計算酶活得:
土壤酸性蛋白酶(U/g 土樣)= 0.1×ΔA 測定÷ΔA 標準÷W= 0.1×0.028÷0.512÷0.1= 0.0547U/g 土樣。
2、 分別稱取 2 份 0.1g 三葉草土樣于 1.5mLEP 管中,分別為對照管及測定管。按照測定步驟操作,使用 1mL 玻璃比色皿測定吸光度,計算ΔA 測定=A 測定管-A 對照管=0.831-0.612=0.219,ΔA 標準=A 標準管-A 空白管=0.540-0.028=0.512,按土壤質量計算酶活得:
土壤酸性蛋白酶(U/g 土樣)= 0.1×ΔA 測定÷ΔA 標準÷W= 0.1×0.219÷0.512÷0.1=0.0313 U/g 土樣。
相關系列產品:
BC0880/BC0885 土壤堿性蛋白酶(S-ALPT)活性檢測試劑盒
測定意義:土壤蛋白酶參與土壤中存在的氨基酸、蛋白質以及其他含蛋白質氮的有機化合物的轉化,其水解產物是高等植物的氮源之一。S-ACPT 在酸性環(huán)境下催化蛋白質水解,與土壤有機質含量、氮素及其他土壤性質有關。
測定原理:酸性條件下,S-ACPT 可將酪蛋白水解產生酪an酸;在堿性條件下,酪an酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍;在680nm 有特征吸收峰。
所需儀器及設備:可見分光光度計、水浴鍋、磁力攪拌器、可調式移液槍、1mL 玻璃比色皿、蒸餾水。
備注:
以上數據均來自公開文獻, 暫未進行獨立驗證, 僅供參考。
土壤酸性蛋白酶活性檢測試劑盒分光光度法 本生生物公司供應:熒光定量PCR耗材,細胞培養(yǎng)類,核酸提取耗材,試劑包裝類,生物試劑,色素,原料,抗原抗體,試劑盒等,通用耗材包括深孔板、96孔硅膠墊、吸頭、封板膜、玻片、試管、量杯、試劑槽、離心管、移液器等。
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